本酶為 HotStart LA Taq DNA 聚合酶，需 95 度加熱 5 分鐘或 98 度加熱 2 分鐘而激活。LA Taq DNA 聚合酶在Taq酶的基礎(chǔ)上進(jìn)行了基因工程改造，含有一段雙鏈DNA結(jié)合蛋白，可以顯著提高聚合酶的延伸能力和延伸速度。因此，LA Taq DNA聚合酶非常適合于擴(kuò)增長片段DNA，擴(kuò)增片段的長度可達(dá) 5-8 kb，延伸速度為 3-4 kb/ min（72℃）。本酶是大腸桿菌重組表達(dá)的DNA 聚合酶，分子量為 107 kDa。該酶具有 5’→3’聚合酶活性，較弱的 5’→3’外切酶活性；無 3’→5’ 外切酶活性。擴(kuò)增產(chǎn)物具有 3'-dA 尾巴。

以大馬哈魚精子 DNA 作為模板/引物，在 72℃、30 min 內(nèi)，將 10 nmole 脫氧核糖核苷酸摻入到酸不溶物中所需的酶量，定義為一個(gè)活性單位（U）。

特點(diǎn)

? 本酶為熱啟動(dòng)聚合酶，可提高擴(kuò)增的特異性，減少非特異性擴(kuò)增和引物二聚體；

? 經(jīng)特殊改造，擴(kuò)增能力強(qiáng)，4kb/min 延伸條件下可有效擴(kuò)增 3-5kb 的 DNA 片段；

? 酶的熱穩(wěn)定性有一定程度提高，可以采用 98 度 2 分鐘預(yù)變性；

? 可在 60-72 度下進(jìn)行兩步法 PCR，縮短整個(gè) PCR 時(shí)間。

? PCR 產(chǎn)物具有 3’-dA 尾巴，可直接用于 T/A 克??；

   ?  可以摻入 dUTP、dITP、熒光標(biāo)記核苷酸。

適用范圍

? 熱啟動(dòng) PCR 擴(kuò)增

? Multiplex PCR

? 菌落PCR

? TA 克隆 PCR 產(chǎn)物添加 3’-dA

 ?  DNA 熒光標(biāo)記